Verificação de eficácia da esterilização de autoclaves

Um dos instrumentos mais essenciais em um laboratório de microbiologia é o esterilizador, sendo a autoclave (esterilizador a vapor de alta pressão) o mais comumente usado. De acordo com o GB 4789.1-2016, o equipamento de laboratório deve ser inspecionado regularmente e/ou calibrado (com tags de inspeção), mantido e reparado para garantir o desempenho adequado e a segurança operacional. Mas sua autoclave sofreu essas inspeções? E se você quiser executar a verificação, como deve fazer isso? Hoje, resumiremos os principais métodos para verificar a eficácia da esterilização dos autoclaves.

A verificação da eficácia da esterilização de autoclave geralmente inclui métodos como indicador químico, termômetro máximo, tubo de temperatura feito por si mesmo e indicador biológico. Embora esses métodos compartilhem princípios semelhantes - confirmando principalmente se o esterilizador atinge a temperatura necessária durante a esterilização - você pode escolher um ou mais com base nas condições específicas do seu laboratório.

1. Método do Indicador Químico

Princípio: os indicadores químicos passam por uma mudança de cor ou forma sob condições específicas de temperatura e tempo. Essa alteração é usada para determinar se os parâmetros de esterilização foram atendidos.

Um item comumente usado em laboratórios é a fita indicadora de autoclave 3M, que muda de cor após a esterilização. A fita é feita de produtos químicos termonsíveis, desenvolvedores de cores e materiais de tinta, impressos em um padrão de faixa na fita adesiva. É aplicado diretamente ao exterior do pacote de esterilização, com um comprimento mínimo de 5 cm. Pressione a fita levemente para garantir boa adesão e vedação. Depois de ser exposto a 121 ° C por 20 minutos ou 130 ° C por 4 minutos, as listras brancas diagonais na fita devem ficar completamente pretas. Se a mudança de cor for desigual ou incompleta, o pacote será considerado não esterilizado adequadamente.

2. Método máximo do termômetro

Princípio: Este método usa um termômetro de mercúrio que não retorna a uma temperatura mais baixa uma vez aquecida, semelhante a um termômetro médico tradicional. Indica a temperatura máxima atingida durante a esterilização.

Para verificação, coloque o termômetro de mercúrio dentro de um frasco de Erlenmeyer cheio de água. Durante a esterilização, posicione o balão nas seções superior e inferior da autoclave. Após o processo, verifique se a leitura do termômetro corresponde à temperatura necessária. Esse método pode verificar apenas a temperatura e não pode confirmar se o requisito de tempo de esterilização foi atendido, por isso representa o padrão mínimo para a verificação de autoclave.

3. Método de tubo de temperatura feito por si mesmo

Princípio: Este método utiliza certos produtos químicos que derretem e recristalizam a temperaturas específicas, com formas distintas de cristal pós-resfriamento. Esses produtos químicos são selados em pequenos tubos de vidro e colocados dentro da autoclave. Após a esterilização, a forma do cristal é examinada para determinar se a temperatura correta foi atingida.

O ácido benzóico é comumente usado, com um ponto de fusão de 121-123 ° C, que se alinha com a temperatura padrão de esterilização padrão da autoclave. O ácido benzóico sólido é selado em pequenos tubos de vidro e colocado na autoclave. Após a esterilização, observa -se que o estado do ácido benzóico confirma se a temperatura alvo foi alcançada. Como o método máximo do termômetro, essa abordagem verifica apenas a temperatura, não a duração da esterilização.

4. Método do Indicador Biológico

Princípio: Este método usa esporos não patogênicos de Geobacillus stearothophilus como organismos indicadores para avaliar a eficácia da esterilização térmica. Esses esporos são altamente resistentes ao calor, com resistência semelhante à dos esporos patogênicos de clostridium botulinum, tornando-os indicadores adequados para verificar a eficácia da esterilização.

Os indicadores biológicos estão disponíveis em três formas: suspensões de esporos, tiras de esporos e tubos integrados de esporos e médicos. Eles geralmente são colocados em cinco locais no recipiente de esterilização: a frente, o meio e a parte traseira da camada inferior, bem como os pontos centrais das camadas superior e médio. Após a esterilização, os indicadores são inoculados em água de bromocresol roxo-glucose-peptona e incubados a 55-60 ° C por 2 a 7 dias. Se o meio permanecer claro e inalterado em cores, os esporos foram mortos, indicando boa esterilização. Se o meio se tornar amarelo e turbido, os esporos sobreviveram, sugerindo um mau desempenho de esterilização. As suspensões de esporos e as tiras de esporos seguem o mesmo processo de validação.

Os tubos indicadores biológicos comerciais também são comumente usados ​​em laboratórios. Eles contêm esporos de Geobacillus Stearothermophilus e uma ampola de vidro selada com meio de crescimento. Os tubos são colocados em todo o recipiente de esterilização. Após a autoclave, a ampola de vidro é esmagada para liberar o meio e o tubo é incubado a 56 ° C, ao lado de um controle positivo. Se a esterilização for inadequada, os esporos sobreviventes crescerão e transformarão o caldo amarelo. Se a esterilização for eficaz, os esporos são inativados e o caldo permanece roxo.

Frequência de verificação

Atualmente, não existe um padrão nacional estrito em relação à frequência da verificação de eficácia de autoclave. Espera -se que os laboratórios estabeleçam seus próprios cronogramas de verificação e aderem estritamente a eles. Considerando a facilidade de uso e a confiabilidade dos resultados, recomendamos o uso de fita indicadora em combinação com tubos indicadores biológicos, pois eles oferecem operação simples e verificação abrangente da eficácia da esterilização.

Notas sobre esterilização (não é necessário para algumas autoclaves totalmente automáticas importadas)
Ao usar um esterilizador de vapor de alta pressão, é crucial expulsar todo o ar frio dentro da câmara quando o vapor é liberado. Somente depois que todo o ar frio é removido se a válvula de escape for fechada. Se houver algum ar, o medidor de pressão pode indicar a pressão correta, mas a temperatura real dentro da câmara ficará aquém. Quanto mais ar reteve, maior a discrepância entre pressão e temperatura, potencialmente resultando em esterilização incompleta. (Isso é frequentemente observado durante a esterilização de meios de fermentação, onde as bolhas de ar permanecem em pequenos tubos -guia - esgotando o ar frio mais bem.)